Coriell Institute細胞是什么,如何進行實驗?
發(fā)布日期:2022-12-07 點擊:1210
Coriell Institute細胞是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。
成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。
Coriell Institute細胞的實驗方法:
1、在細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)貼壁MRC-5細胞,并傳代至9個T25細胞培養(yǎng)瓶內(nèi),將配制好的不同pH值細胞培養(yǎng)液,加到T25培養(yǎng)瓶中。
2、每天用倒置顯微鏡觀察細胞的生長狀態(tài),包括細胞的形態(tài)、密度、增殖速度等,并拍照記錄,直至細胞長成致密單層為止。
3、加入適量的消化液,消化半分鐘后倒掉消化液,加入培養(yǎng)液吹打細胞至分散,制成細胞懸液。
4、顯微鏡下觀察不同pH值培養(yǎng)液中的細胞形態(tài),并用細胞計數(shù)儀對細胞數(shù)量進行計數(shù)。
30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。
細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞在合成和分泌細胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用。